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Diagnosis of leptospirosis by dark-field microscopy of blood samples and culture Diagnóstico de leptospirosis de muestras de sangre y cultivo por observación en microscopio de campo oscuro

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Author(s): Piedad Agudelo-Flórez | Marcos Restrepo | Natalí Moreno

Journal: Biomédica
ISSN 0120-4157

Volume: 28;
Issue: 1;
Start page: 7;
Date: 2008;
Original page

Keywords: leptospirosis/diagnóstico | Leptospira | microscopía

ABSTRACT
Leptospirosis, one of the most extended zoonosis in the world is considered a reemergent disease. It is produced by the pathogenic species of the genus Leptospira. There are approximately 13 of 17 species described up to date. These species are indistinguishable morphologically and their taxonomic classification is done by molecular methods. Leptospirosis presents with multiple unspecific clinical symptoms that make it difficult to confirm the case. To verify the diagnoses, the medical personnel need to know how to recognize the clinical manifestations for leptospirosis and to corroborate a good diagnostic suspicion, in addition to ordering the appropriate tests to the laboratory for: 1) dark field microscopy visualization of the bacteria in blood samples, urine or postmortem tissues which need to use special stains like silver stain or immunofluorescence; 2) having positive culture for leptospirosis from blood, urine, CSF or of tissues postmortem; 3) having an increase (fourfold rise) of the tires in microagglutination test from two serum samples taken with an interval of 15 days apart, 4) an elevated unique title (>1:400) using microagglutination for serological diagnosis or IgM detection test, and 5) positive PCR assay in blood, urine, CSF or tissues postmortem. Due to the fact that the first two tests for diagnosis needs a trained personnel for Leptospiras visualization, we would like to present to the medical community reference images of Leptospira species that can be observed by dark field microscopy from as blood as cultures. It is necessary to have methods for leptospirosis in the public health laboratories; additionally, to have qualified personnel to realize them. This will allow confirming a clinical diagnosis with symptoms that resemble other endemic diseases in Colombia, like dengue and malaria.La leptospirosis, una de las zoonosis más extendidas en el mundo, es considerada una enfermedad reemergente, producida por especies patógenas del género Leptospira que comprende, aproximadamente, 13 de las 17 especies descritas hasta el momento; éstas son indistinguibles morfológicamente y su clasificación taxonómica se hace por métodos moleculares. La leptospirosis se presenta con múltiples síntomas inespecíficos y para llegar a la definición de caso confirmado, el personal médico debe, además de reconocer las manifestaciones clínicas que coinciden con leptospirosis, confirmar la sospecha diagnóstica de la enfermedad por laboratorio, bien sea por: 1) observación al microscopio de campo oscuro de la bacteria en muestras de sangre u orina, o en tejidos obtenidos post mórtem y, en este caso, se usan coloraciones especiales de plata o inmunofluorescencia; 2) cultivo positivo (sangre, orina, líquido cefalorraquídeo o muestras post mórtem); 3) incremento o alza cuádruple de los títulos por microaglutinación en sueros pareados tomados con un intervalo de 15 días; 4) título alto único (>1:400) utilizando diagnóstico serológico por microaglutinación o pruebas que detecten IgM, o 5) resultado positivo de la prueba de reacción en cadena de la polimerasa en sangre, orina, líquido cefalorraquídeo o muestras de tejidos post mórtem. Debido a que las dos primeras formas de diagnóstico requieren de un personal experto para la visualización de Leptospira spp., nos proponemos presentar a la comunidad médica imágenes de referencia de Leptospira spp. que se observan en el microscopio de campo oscuro provenientes de muestras de sangre o de cultivo. Se necesita disponer de métodos de diagnóstico para leptospirosis en los laboratorios de salud pública, además de personal capacitado para realizarlos, lo cual permite confirmar el diagnóstico clínico de una etiología que como ésta, presenta síntomas comunes a otras enfermedades endémicas en Colombia, como son el dengue y el paludismo.
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