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Differential gene expression, induced by salicylic acid and Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici infection, in tomato Expressão diferencial de genes induzida por ácido salicílico e por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici, em tomateiro

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Author(s): Daniel Oliveira Jordão do Amaral | Marleide Magalhães de Andrade Lima | Luciane Vilela Resende | Márcia Vanusa da Silva

Journal: Pesquisa Agropecuária Brasileira
ISSN 0100-204X

Volume: 43;
Issue: 8;
Start page: 1017;
Date: 2008;
Original page

Keywords: Lycopersicon esculentum | bibliotecas de cDNA | DNA complementar | expressão gênica | ácido salicílico | hibridização subtrativa por supressão | Lycopersicon esculentum | cDNA libraries | complementary DNA | gene expression | salicylic acids | suppression subtractive hybridization

ABSTRACT
The objective of this work was to determine the transcript profile of tomato plants (Lycopersicon esculentum Mill.), during Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici infection and after foliar application of salicylic acid. The suppression subtractive hybridization (SSH) technique was used to generate a cDNA library enriched for transcripts differentially expressed. A total of 307 clones was identified in two subtractive libraries, which allowed the isolation of several defense-related genes that play roles in different mechanisms of plant resistance to phytopathogens. Genes with unknown roles were also isolated from the two libraries, which indicates the possibility of identifying new genes not yet reported in studies of stress/defense response. The SSH technique is effective for identification of resistance genes activated by salicylic acid and F. oxysporum f. sp. lycopersici infection. Not only the application of this technique enables a cost effective isolation of differentially expressed sequences, but also it allows the identification of novel sequences in tomato from a relative small number of sequences.O objetivo deste trabalho foi determinar o perfil de transcritos em plantas de tomate (Lycopersicon esculentum Mill.), durante a infecção com Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici e após a aplicação foliar de ácido salicílico. A técnica de hibridização subtrativa por supressão (SSH) foi utilizada para gerar uma biblioteca de cDNA enriquecida por transcritos diferencialmente expressos. Foram identificados 307 clones, em duas bibliotecas subtrativas, que permitiram o isolamento de diversos genes de defesa com função em diferentes processos relacionados à resistência vegetal contra patógenos. Também foram isolados, nas duas bibliotecas, genes com função desconhecida, o que indica a possibilidade de identificação de novos genes que ainda não tenham sido relatados em estudos anteriores de resposta a estresses e defesa, em plantas. A técnica SSH é eficiente em identificar genes de resistência, ativados pelo ácido salicílico e pela infecção com Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. A aplicação dessa técnica não apenas possibilita isolar seqüências diferencialmente expressas, a baixo custo, como também permite a identificação de novas seqüências, em tomate, a partir de um número relativamente pequeno de seqüências.
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