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Identificación de las proteínas de 35 y 38 kDa específicas de Brucella ovis

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Author(s): Díaz Aparicio, Efrén | Mejía Sánchez, Pedro | Salas Téllez, Enrique | Tenorio Gutiérrez, Víctor Rubén

Journal: Técnica Pecuaria en México
ISSN 0040-1889

Volume: 42;
Issue: 2;
Start page: 277;
Date: 2004;
Original page

Keywords: Brucella ovis | Brucella melitensis | Proteínas | Diagnóstico.

ABSTRACT
La técnica de inmunotransferencia se ha utilizado como prueba auxiliar para el diagnóstico de Brucella ovis, corroborando el diagnóstico con fijación de complemento (FC), inmunodifusión doble en agar (IDG) y el ensayo inmunoenzimático (ELISA). El extracto salino caliente (HS) de B. ovis, es el antígeno que más se ha utilizado en estas pruebas; sin embargo, se ha observado gran similitud entre las bandas proteicas de B. ovis y B. melitensis, existiendo con esto una reacción cruzada con sueros contra B. melitensis, lo que interfiere con el diagnóstico. Por ello, el objetivo fue identificar proteínas específicas de B. ovis, y evaluar el patrón de antigenicidad por inmunotransferencia. Se utilizaron cepas de B. ovis, B. melitensis, M. haemolytica, A. seminis y H. somnus. De las cepas de B. ovis Reo 198 y de B. melitensis 16M, se obtuvieron las fracciones celulares (membrana externa, interna y citosol). Se cuantificaron proteínas y se realizó la electroforesis PAGE-SDS de las fracciones celulares y de los extractos totales de todos los microorganismos. Las proteínas fueron transferidas a membranas de nitrocelulosa, y tratadas con suero hiperinmune contra B. ovis. Se identificaron tres bandas de reconocimiento, de 35, 38 y 81 kDa específicas de B. ovis, que no aparecieron en B. melitensis, ni en los demás microorganismos. Estas proteínas podrían ser utilizadas en el diagnóstico de la epididimitis por B. ovis, y debidamente estandarizada, presentar una sensibilidad y especificidad superior a inmunodifusión doble en agar o a fijación de complemento.
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