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Optimización de un protocolo de extracción de ADN genómico para Pinus tecunumanii

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Author(s): David A. Cerda-Granados | Verónica Díaz

Journal: Encuentro
ISSN 0424-9674

Issue: 94;
Start page: 82;
Date: 2013;
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Keywords: extracción de ADN | Pinus tecunumanii | RAPD | PCR

ABSTRACT
Se optimizó un protocolo para la extracción de ADN genómico de Pinus tecunumanii basado en el método de extracción de Doyle y Doyle (1990). Se probaron los megagametofitos de las semillas de árboles deP. tecunumanii muestreados en cinco poblaciones naturales de Nicaragua. El método consta de maceración del tejido en tubos Eppendorf, una extracción con bromuro trimetil amonio de cetilo (CTAB)empleando altas concentraciones de sales, proteinasa K, extracciones sucesivas con cloroformo-alcohol isoamílico y un tratamiento con ARNasa A. El rendimiento fue aproximadamente 13μg de ADN por 58.7 mg de tejido inicial fresco. El ADNgenómico obtenido por este método fue apropiado para ser usado en reaccionesRAPD (ADN polimórfico amplificado al azar)
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