Author(s): Iris Pérez-Almeida | Luis Angulo Graterol | Gustavo Osorio | Catalina Ramis | Ángela María Bedoya | Rosana Figueroa-Ruiz | Sandy Molina | Diógenes Infante
Journal: Bioagro
ISSN 1316-3361
Volume: 23;
Issue: 1;
Start page: 27;
Date: 2011;
Original page
Keywords: Diversidad genética | ISTR | RAPD | Genetic diversity | ISTR | RAPD
ABSTRACT
Dado que la eficacia de los distintos protocolos existentes para aislar ADN en cantidad y calidad suficiente puede diferir según el cultivo, es necesario estandarizar los métodos de extracción para garantizar su sencillez y efectividad. En este trabajo se propone una modificación al método de Risterucci et al. (2000) el cual fue comparado con otros protocolos para la extracción de ADN de hojas de Cattleya spp. con el fin de seleccionar el método más apropiado a usar en el análisis del potencial genético de estas especies a través de marcadores moleculares como RAPD e ISTR. Con el método propuesto se obtuvo ADN similar al obtenido utilizando un kit comercial, ya que ambas metodologías produjeron ADN en apropiada cantidad y calidad. El método ofrece ventajas sobre otros protocolos, principalmente debido al reducido número de pasos para la obtención del ADN, facilidad de ejecución y, en especial, su alta estabilidad, lo cual le favorece en aquellos casos en que se requiera procesar muchas muestras simultáneamente, minimizando las posibilidades de contaminación accidental.Since the effectiveness of the different protocols for isolating DNA in sufficient quantity and quality may vary depending on the crop, it is necessary to standardize the extraction methods to ensure its simplicity and effectiveness. In this paper we propose a modification to the method of Risterucci et al. (2000), which was compared with other protocols to extract DNA from leaves of Cattleya spp. to select the most appropriate method to use for analyzing the genetic potential of the species through molecular markers such as RAPD and ISTR. With the proposed method the obtained DNA was similar to that extracted using a commercial kit, since both methods produced DNA in appropriate quantity and quality. The method offers advantages over other protocols, mainly because the low number of steps for obtaining DNA, ease of implementation and especially, high stability, which is favorable in cases where it is required to process many samples, reducing the possibility of accidental contamination.
Journal: Bioagro
ISSN 1316-3361
Volume: 23;
Issue: 1;
Start page: 27;
Date: 2011;
Original page
Keywords: Diversidad genética | ISTR | RAPD | Genetic diversity | ISTR | RAPD
ABSTRACT
Dado que la eficacia de los distintos protocolos existentes para aislar ADN en cantidad y calidad suficiente puede diferir según el cultivo, es necesario estandarizar los métodos de extracción para garantizar su sencillez y efectividad. En este trabajo se propone una modificación al método de Risterucci et al. (2000) el cual fue comparado con otros protocolos para la extracción de ADN de hojas de Cattleya spp. con el fin de seleccionar el método más apropiado a usar en el análisis del potencial genético de estas especies a través de marcadores moleculares como RAPD e ISTR. Con el método propuesto se obtuvo ADN similar al obtenido utilizando un kit comercial, ya que ambas metodologías produjeron ADN en apropiada cantidad y calidad. El método ofrece ventajas sobre otros protocolos, principalmente debido al reducido número de pasos para la obtención del ADN, facilidad de ejecución y, en especial, su alta estabilidad, lo cual le favorece en aquellos casos en que se requiera procesar muchas muestras simultáneamente, minimizando las posibilidades de contaminación accidental.Since the effectiveness of the different protocols for isolating DNA in sufficient quantity and quality may vary depending on the crop, it is necessary to standardize the extraction methods to ensure its simplicity and effectiveness. In this paper we propose a modification to the method of Risterucci et al. (2000), which was compared with other protocols to extract DNA from leaves of Cattleya spp. to select the most appropriate method to use for analyzing the genetic potential of the species through molecular markers such as RAPD and ISTR. With the proposed method the obtained DNA was similar to that extracted using a commercial kit, since both methods produced DNA in appropriate quantity and quality. The method offers advantages over other protocols, mainly because the low number of steps for obtaining DNA, ease of implementation and especially, high stability, which is favorable in cases where it is required to process many samples, reducing the possibility of accidental contamination.
