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Papel del Tecnólogo en Medicina Nuclear en el desarrollo de técnicas centellográficas, de cirugía radioguiada y moleculares. Trabajo distinguido con el Premio al mejor trabajo presentado por Tecnólogo

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Author(s): Álvarez, Bettina. | Juri, Cecilia. | Manrique, Gonzalo. | Andruskevicius, Patricia. | Cánepa, Jorge. | Coppe, Fátima. | Cuervo, Aurora. | López, Andrea. | González, Mirta. | Guissoli, Patricia. | Rodríguez, Sergio.

Journal: Alasbimn Journal
ISSN 0717-4055

Volume: 8;
Issue: 32;
Date: 2006;
Original page

Keywords: Tecnólogo | ganglio centinela | linfocentellografia | biología molecular | RT-PCR.

ABSTRACT
En nuestro centro el Tecnólogo en Medicina Nuclear interviene activamente en el desarrollo y evaluación de metodologías de Medicina Nuclear y de Biología Molecular vinculadas con la estrategia del ganglio centinela (GC). El objetivo del presente trabajo fue el de validar las técnicas nucleares y moleculares utilizadas mediante parámetros clínicos y pronósticos conocidos de la enfermedad. Incluimos prospectivamente 40 pacientes con melanoma clínicamente localizado, con un espesor medio de Breslow de 3.6 mm (rango: 0.5-15.0 mm). La edad media de los pacientes fue de 54.2 años (rango: 24-82 años), siendo 25 del sexo femenino. Se utilizó como radiofármaco al 99mTc – nanocoloide de albúmina, realizando el estudio linfocentellográfico 16-18 horas antes de la cirugía, con una dosis total de 111-185 MBq. Se adquirieron imágenes secuenciales de 5 minutos en gama cámara, continuando hasta una hora post inyección de no visualizarse precozmente drenaje. Una vez localizado el(los) GC, realizamos vistas ortogonales a los efectos de localizar dichos ganglios en el espacio tridimensional. Los territorios ganglionares identificados mediante linfocentellografía fueron explorados quirúrgicamente mediante la ayuda de una sonda gama intraoperatoria. La radiactividad ganglionar y de los tejidos adyacentes fue medida in vivo y verificada ex vivo luego de la resección. Una relación de conteo ganglio/fondo mayor a 2 in vivo y mayor a 10 veces ex vivo fue considerada a los efectos de considerar un ganglio como GC. Los mismos fueron analizados mediante histopatología y en 14 pacientes se estudió además la expresión mediante RT-PCR, de los marcadores TIR, MART-1 y MIA, usando un protocolo de una fase con 35 ciclos de amplificación. Los experimentos fueron realizados en duplicado e incluyeron controles positivos y negativos. Los GC fueron identificados en 38/39 pacientes operables (97.4%), extirpándose una media de 1.3 ganglios. Se diagnosticaron metástasis ganglionares por histopatología en 9 pacientes (24%). Se constató una asociación significativa entre el compromiso metastásico del GC y la presencia de recaída de la enfermedad (p=0.019), durante un período de seguimiento medio de 40.8 meses (rango: 6.7-94.6 meses). Solamente una paciente presentó recaída en un territorio correspondiente a un GC negativo. La RT-PCR resultó positiva en GC de 2/14 (14%), 3/14 (21%) y 6/14 (43%) pacientes, para los marcadores MART-1, MIA y TIR, respectivamente. En esta muestra, todos los GC positivos por histopatología (n=3) resultaron también positivos por RT-PCR. Los GC con positividad para por lo menos un marcador, correspondieron a pacientes con espesor de Breslow significativamente mayor (4.27±1.60 mm) que aquellos con un estudio molecular negativo (2.31±1.21 mm, p=0.024). Concluimos que las características evolutivas y clínico-biológicas de la muestra estudiada son similares a las obtenidas por los grandes estudios multicéntricos, validando la metodología utilizada.In our center the Technician in Nuclear Medicine participates in the development and evaluation of Nuclear Medicine and Molecular Biology linked methodologies, with the strategy of the sentinel lymph node (SLN). The aim of the present work is to validate nuclear and molecular methods, using known clinical and prognostic illness parameters. We included prospectively 40 patients with clinically localized melanoma, with an average of 3.6 mm (status: 0.5-15.0 mm) Breslow thickness. The middle age of the patients was 54.2 years (status: 24-82 years), 25 females and 15 males. The tracer used was 99mTc labeled albumin nanocolloid, doing a lymphoscintigraphy 16-18 hours before the surgery, with a total dose of 111-185 MBq. Sequential images were acquired every 5 minutes in a gamma camera during an hour post injection or until drainage was visualzed.Once a SLN was located, we did an orthogonal view to locate the nodals in the three-dimensional space. The nodal territories identified by means of lymphoscintigraphy were explored surgically employing an intraoperative gamma probe. Nodal and adjacent tissue radioactivity was measured in vivo and verified ex vivo after the resection. A relation of counts node/background bigger than 2 in vivo and bigger than 10 ex vivo was established in order to consider a node SLN. The SLNs were analyzed by means of histopathology and in 14 patients the expression was studied also using RT-PCR, employing TIR, MART-1 and MIA as markers, in a single-step protocol with 35 cycles of amplification. The experiments were done in duplicates and they included positive and negative control panels. SLN was identified in 38/39 surgical patients (97.4 %), each patient presenting an average of 1.3 nodal.Nodal metastasis were diagnosed by histopathology in 9 patients (24 %). A significant correlation was stated between the metastasis commitment of the SLN and the illness relapsing (p=0.019) during the follow up of 40.8 months (status: 6.7-94.6 months). Only one patient showed a relapsing in a territory corresponding to a negative SN. The RT-PCR was positive in 2/14 (14 %), 3/14 (21 %) and 6/14 (43 %) SLN patients, for MART-1, MIA and TIR, respectively. In the studied samples, all the positive SLN for histopathology (n=3) were also positives for RT-PCR. Positive SLN for at least one marker corresponded to patients with Breslow thickness significantly higher (4.27±1.60 mm) than those with a molecular negative study (2.31±1.21 mm, p=0.024). We conclude that the evolutionary and clinical - biological characteristics of the studied samples are similar to the ones obtained by multi-center studies, validating the methodology we have employed.
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