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Un nuevo medio de cultivo líquido para el patógeno Piscirickettsia salmonis A new liquid medium for the pathogen Piscirickettsia salmonis

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Author(s): T Vera | A Isla | A Cuevas | J Figueroa

Journal: Archivos de Medicina Veterinaria
ISSN 0301-732X

Volume: 44;
Issue: 3;
Start page: 273;
Date: 2012;
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Keywords: cultivo líquido | Piscirickettsia salmonis | liquid culture | Piscirickettsia salmonis

ABSTRACT
Piscirickettsia salmonis es el agente causal del Síndrome Rickettsial Salmonídeo (SRS), el cual se describió por primera vez en cultivos de salmón Coho en las costas del Sur de Chile en el año 1989 y desde entonces se ha reportado en distintos lugares alrededor del mundo. Inicialmente esta bacteria se describió como un patógeno intracelular obligado, capaz de crecer sólo dentro de vacuolas citoplasmáticas de la célula hospedera en donde se replica por división binaria, por lo que su cultivo in vitro se realiza principalmente en líneas de células derivadas de peces. Actualmente se ha demostrado que esta bacteria es capaz de crecer en medios libres de células, conteniendo sangre de oveja o peces y altos niveles de cisteína. Sin embargo, estos medios de cultivo cuentan con la presencia de elementos celulares, lo que presenta inconvenientes de manejo, almacenamiento y costos elevados. Por este motivo se propone un medio de cultivo artificial suplementado con una sal de hierro en reemplazo de la sangre utilizada tradicionalmente. En el presente trabajo se logró un exitoso crecimiento bacteriano de la cepa tipo y cepas de campo el que fue evaluado por densidad óptica (DO600); la pureza e identidad del cultivo fueron comprobadas por tinción de gram, inmunofluorescencia y PCR. La formulación de un medio de cultivo libre de sangre facilita el cultivo de P. salmonis y permite el crecimiento de esta bacteria en medio líquido, el cual facilita diversas aplicaciones microbiológicas y biotecnológicas.Piscirickettsia salmonis is the ethiologic agent of the Salmonid Rickettsial Syndrome (SRS), which was first described in cultured Coho salmon in the south coast of Chile in 1989 and since then has been reported in different places around the world. Initially, this bacterium was described as an obligate intracellular pathogen, able to grow only in cytoplasmic vacuoles in host cell where it replicates by binary fission, so their in vitro culture is performed mainly in cell lines derived from fish. Recently, it has been demonstrated that this bacterium can grow in cell-free media containing sheep blood or fish and high levels of cysteine; however, due to the presence of cellular elements these culture media present drawbacks regarding handling, storage and high costs. We propose an artificial culture medium supplemented with an iron salt to replace the blood that is traditionally used; it reported successful growth of the bacterial reference strain and of a strain isolated from the environment, which was evaluated by optical density (OD600), while purity and identity of the culture were checked by using Gram stain, immunofluorescence and PCR. Developing a blood-free culture medium facilitates the cultivation of P. salmonis and allows the growth of this bacterium in a liquid medium, which provides various microbiological and biotechnological applications.
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